5 ~ 6.巧。
[0101] 在本发明的实施方案中，所述多糖成分II中岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖的相 对摩尔比为 1. 0 ;1. 63 ;0. 16 ;6. 29。
[0102] 根据本发明第走方面任一项的巧冬多糖成分，其中多糖成分I的峰高分子量约 为27900Da，分子量范围为1. 0 X 1〇4~5. 0 X 1〇4〇日，例如1. 0 X 1〇4~5. 0 X 1〇4〇日，再例 如2. 0X 104~4. 0X 104Da，和/或多糖成分II的峰高分子量约为29000Da，分子量范围为 1. 0 X 1〇4 ~6. 0 X 1〇4〇日，例如 1. 0 X 1〇4 ~5. 0 X 1〇4〇日，再例如 2. 0 X 1〇4 ~4. 5 X 1〇4〇日。
[0103] 根据本发明第走方面任一项的巧冬多糖成分，所述多糖成分I和/或多糖成分II 中含糖量为90% W上，例如为95% W上，例如为98%，例如为99%，例如为100%。
[0104] 在本发明的实施方案中，所述多糖成分I和/或多糖成分II为分子量均一的杂多 糖，分子量成正态分布。
[0105] 在本发明的一个具体实施方案中，所述多糖成分I为PCP- I。
[0106] 在本发明的一个具体实施方案中，所述多糖成分II为PCP- II。
[0107] 本发明第八方面涉及药用组合物，其包含本发明任一项所述的巧冬多糖组分或者 本发明任一项所述的巧冬多糖成分，任选的，还包含药用辅料和/或其它疫苗辅料。
[0108] 本发明第九方面涉及疫苗制剂或疫苗组合物，其包含本发明任一项所述的巧冬多 糖组分、本发明任一项所述的巧冬多糖成分或本发明任一项所述的组合物。
[0109] 本发明第十方面涉及疫苗佐剂，其包含本发明任一项所述的巧冬多糖组分或者本 发明任一项所述的巧冬多糖成分。
[0110] 本发明第十一方面涉及疫苗辅料，其包含本发明任一项所述的巧冬多糖组分或者 本发明任一项所述的巧冬多糖成分。
[0111] 本发明第十二方面涉及本发明任一项所述的巧冬多糖组分或者本发明任一项所 述的巧冬多糖成分用于制备抗体（例如哺乳动物用抗体）、疫苗制剂或疫苗组合物的用途， 或者作为疫苗辅料或疫苗佐剂的用途。
[0112] 本发明第十Η方面涉及本发明任一项所述的巧冬多糖组分或者本发明任一项所 述的巧冬多糖成分作为免疫调节剂的用途。
[0113] 本发明第十四方面涉及一种制备抗体的方法，其包括使用有效量的本发明任一项 所述的巧冬多糖组分或者本发明任一项所述的巧冬多糖成分的步骤。
[0114] 根据本发明任一项所述的方法或用途，其中，所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗 体。
[0115] 本发明还涉及一种免疫方法，其包括给有需要的受试者施用本发明任一项所述的 巧冬多糖成分或者本发明任一项所述的巧冬多糖组分的步骤。
[0116] 发明的有益效果
[0117] 本发明从巧冬中分离得到了巧冬总多糖（Poria cocos polysaccharides)，并进 一步从总多糖得到两种多糖组分A和B，W及从多糖组分A中得到多糖成分I，从多糖组分 B中得到多糖成分II。对送几种多糖组分或多糖成分的理化性质和化学结构进行分析，并 评价其疫苗佐剂和免疫调节活性。活性实验结果表明，巧冬多糖组分A和B、多糖成分I和 II均具有良好的免疫佐剂活性和免疫调节作用，为疫苗佐剂、疫苗辅料和免疫调节剂W及 疫苗组合物、疫苗制剂和抗体的制备等提供了新的选择。
[0118] 本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，提及的术语 和短语如有与公知含义不一致的，W本发明所表述的含义为准。
[0119] 在本发明中，所述巧冬多糖组分是指在本发明所得巧冬总多糖的基础上进一步提 取得到的含糖量为50% W上（例如50 - 80% )的巧冬提取物，其还可能含有洗脱和透析 后残留的盐、残留的小分子W及蛋白、躁质等成分。
[0120] 在本发明中，所述巧冬多糖成分是指在本发明所得巧冬多糖组分的基础上进一 步提取得到的分子量均一的巧冬多糖，其中含糖量为90% W上，例如为95% W上，例如为 98%，例如为99%，例如为100%。。
[0121] 在本发明中，所述疫苗为减毒疫苗、灭活疫苗、蛋白质亚单位疫苗、嵌合载体疫苗、 DNA疫苗、RNA疫苗、多肤疫苗或小分子-蛋白偶合物疫苗。在本发明的一个实施方案中，所 述疫苗为H1N1流感病毒灭活疫苗；在本发明的第二个实施方案中，所述疫苗为己肝病毒蛋 白亚单位疫苗。在本发明的第Η个实施方案中，所述疫苗为小分子-蛋白偶合物疫苗。
[0122] 在本发明中，免疫佐剂也称为佐剂，是指能非特异性地增强对抗原免疫应答的物 质，其先于抗原或与抗原一起注入机体，可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类 型。
[0123] 在本发明中，疫苗佐剂是指能够用于疫苗的佐剂，其它疫苗佐剂例如氨氧化铅或 磯酸铅或白油等佐剂。
[0124] 在本发明中，疫苗与疫苗制剂含义相同，是指所有用减毒或杀死的病原生物（细 菌、病毒、立克次体等）或其它抗原性物质所制成，可使机体产生特异性免疫，用于预防接 种或治疗的生物制剂。
[0125] 在本发明中，疫苗辅料是指所有能提高疫苗制剂稳定性、溶解性及增强免疫效果 等多功效的物质。
[0126] 在本发明中，免疫调节剂是指能调节、增强并恢复机体免疫功能的一类制剂，常用 的免疫调节剂有免疫促进剂、免疫抑制剂和免疫双向调节剂Η大类。
【附图说明】
[0127] 图1为巧冬总多糖（PC巧在DEAE-纤维素柱层析的流出图；
[0128] 图2为PCP-A在Se地adex G-100柱层析的流出图；
[0129] 图3为PCP-B在Se地adex G-100柱层析的流出图；
[0130] 图4为巧冬多糖组分PCP-A的HPGPC图谱；
[0131] 图5为巧冬多糖组分PCP-B的HPGPC图谱；
[0132] 图6为巧冬多糖组分PCP-A和PCP-B的单糖CE图谱
[0133] 图7为巧冬多糖成分PCP-I的HPGPC图谱；
[0134] 图8为巧冬多糖成分PCP- II的HPGPC谱图；
[0135] 图9为巧冬多糖成分PCP-I的单糖CE图谱
[0136] 图10为巧冬多糖成分PCP-II的单糖CE图谱
[0137] 图 11 为 PCP-I 的 IR 图谱；
[013引 图12为PCP-I的iH-NMR图谱；
[0139] 图 13 为 PCP-I 的"C-NMR 图谱；
[0140] 图14为PCP-I甲基化产物的GC图谱；
[0141] 图15-1~15-18为PCP-I甲基化产物主要的离子碎片图谱
[0142] 图 16 为 PCP-II 的 IR 图谱；
[014引 图 17 为 PCP-II 的 iH-NMR 图谱；
[0144]图 18 为 PCP-II 的"C-NMR 图谱；
[014引 图19为PCP-II甲基化产物的GC图谱；
[0146] 图20-1~20-11为PCP-II甲基化产物主要的离子碎片图谱
[0147] 图21为PCP-A和PCP-B对己肝抗原初次免疫小鼠抗体滴度的影响；与生理盐水组 (control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ;与 铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01 ;
[0148] 图22为PCP-A和PCP-B对己肝抗原二次免疫小鼠抗体滴度的影响；与生理盐水组 (control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ;与 铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01 ;
[0149] 图23为多糖成分PCP-I对己肝抗原初次免疫小鼠抗体滴度影响；与生理盐水组 (control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ;与 铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01。
[0150] 图24为多糖成分PCP-I对己肝抗原初次免疫小鼠亚类抗体滴度影响；与生理盐水 组（control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ; 与铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01 ;
[0151] 图25为多糖成分PCP-n对己肝抗原初次免疫小鼠抗体滴度影响；与生理盐水组 (control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ;与 铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01。
[0152] 图26为多糖成分PCP-II对己肝抗原初次免疫小鼠亚类抗体滴度影响；与生理 盐水组（control)相比，*P<0. 05,叩<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05， ##P<0. 01 ;与铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，中<0. 05, $$P<0. 01 ;
[0153] 图27为多糖成分PCP-I对己肝抗原二次免疫小鼠抗体滴度影响；与生理盐水组 (control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ;与 铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01 ;
[0154] 图28为多糖成分PCP-I对己肝抗原二次免疫小鼠亚类抗体滴度影响；与生理盐水 组（control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ; 与铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01 ;
[01巧]图29为多糖成分PCP-n对己肝抗原二次免疫小鼠抗体滴度影响；与生理盐水组 (control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05，##P<0. 01 ;与 铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，啼<0. 05, $$P<0. 01 ;
[0156] 图30为多糖成分PCP-II对己肝抗原二次免疫小鼠亚类抗体滴度影响；与生理 盐水组（control)相比，*P<0. 05,叩<0. 01 ;与单独己肝抗原组化BsAg)相比，#P<0. 05， ##P<0. 01 ;与铅佐剂组（A1 (0H)3)相比，中<0. 05, $$P<0. 01。
[0157] 图31为多糖成分PCP-I和PCP-n对H1N1流感抗原初次免疫小鼠抗体滴度影响： 与生理盐水组（control)相比，*P<0. 05, **P<0. 01，与单独化N1流感抗原组化1N1)相比， #P<0. 05, ##P<0. 01 ;与铅佐剂组（Alum)相比，啼<0. 05, $中<0. 01。
[015引图32为多糖成分PCP-I和PCP-n对H1N1流感抗原二次免疫小鼠抗体滴度影响： 与生理盐水组（control)相比，*P<0. 05，**P<0. 01，***P<0. 01 ;与单独H1N1抗原组化1N1)相 比，#P<0. 05, ##P<0. 01 ;与铅佐剂组（Alum)相比，啼<0. 05, $中<0. 01。
【具体实施方式】
[0159] 下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会 理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发