胁生命的肝损伤"是指如果不治疗在确定的时间时期内具有引起死亡的高概率 的肝损伤。用于本文时，术语"不威胁生命的肝损伤"是指如果不治疗在确定的时间时期内 具有引起死亡的低概率的肝损伤。高概率是大于70% (例如，至少75%，80%，85%，90%， 95%以上）。低概率是小于30% (例如，不大于25%，20%，15%，10%，5%以下）。确定的 时间时期可以是，例如，几个月（例如，3个月，6个月，9个月，1年），但是优选是6个月。术 语"肝损伤"用在本文中包括肝衰竭（例如，急性肝衰竭和亚急性肝衰竭）。
[0041] 表征个体中肝损伤的方法中的步骤可以在多种情形中应用。因此，本发明包括评 估参与临床试验的受试者中的肝损伤的方法，评估患有肝损伤的个体的存活性的方法，和 在多名患者中优先排序一名或多名患者接受肝移植的方法。这些方法中的每一种都涉及分 析特定的免疫分析物的浓度水平，所述免疫分析物鉴定为与急性肝相关的生物标记。所用 的免疫分析物生物标记可以选自 TNFa，IL-12, IL-17, IL-4, IL-5, IL-13, IL-9, MIP-1 0， RANTES，FGF b，PDGF-bb，IL-6,以及它们的任意组合。除了分析特定的免疫分析物生物标 记之外，还可以相对于与肝损伤相关的血清白蛋白的预先确定范围（例如，2-5g/dL，2-4g/ dL，2-3g/dL，2. 5-3g/dL)或截点值（例如，3. 5g/dL，3. 2g/dL 或 2. 8g/dL)评价患者的血清 白蛋白浓度水平。在某些实施方案中，所述预先确定的血清白蛋白范围是2.5-3. Og/dL。在 某些优选的实施方案中，所述预先确定的血清白蛋白截点值是2. 8g/dL。可以基于假阳性和 假阴性的相关比率的考虑来进行预先确定的血清白蛋白范围或截点值的选择。
[0042] 免疫分析物和/或血清白蛋白的浓度值可以间接或直接获得。在某些实施方案 中，"间接获得"是指从第三方（如诊断公司）获得浓度值，而"直接获得"是指通过直接的 测量（例如，使用"内部"实验室）获得浓度。所述免疫分析物可以通过用适当的测定（例 如，设计或设定用于检测和/或定量特定的目的免疫分析物的多路测定）进行测量而获得。 类似地，样品的血清白蛋白的浓度值可以直接或间接获得，这在本领域中是公知的。相关的 测定包括基于抗体的测定（例如，ELISA)和非基于抗体的测定（例如，质谱法）。备选地， 在某些实施方案中，可以通过测量相对应的mRNA的表达（例如，使用PCR或任意其他适当 形式的扩增）而间接检测所述免疫分析物和/或血清白蛋白。本领域技术人员容易理解，使 用诸如PCR的间接技术需要包含足量的mRNA的样品，并且优选分泌目的分析物的细胞（例 如，诸如组织或全血样品）。
[0043] 在已经得到特定的目的免疫分析物各自的浓度值后，然后在个体基础上将这些值 与在健康个体（例如，具有健康的肝脏的个体）的血液（例如，血清或血浆）中发现的相对 应的免疫分析物的中值浓度进行比较。按照本发明的某些实施方案，有这样的步骤：确定所 得到的一种或多种免疫分析物的浓度中的任一种（例如，来自患者的血液样品）是否小于 健康个体中相对应的免疫分析物的中值浓度。除了比较目的免疫分析物的测量值之外，还 将得到的患者血液样品中的血清白蛋白浓度值与预先确定的范围（例如，2-5g/dL，2-4g/ dL，2-3g/dL 或 2. 5-3g/dL)或截点值（例如，3. 5g/dL，3. 2g/dL 或 2. 8g/dL)进行比较，并且 确定所述样品的血清白蛋白浓度值是（i)小于预先确定的范围（或小于或等于预先确定的 截点值），还是（ii)在预先确定的范围内（或大于预先确定的截点值）。
[0044] 按照本发明某些实施方案，如果（1)个体的血清白蛋白浓度小于或等于预选的 范围（例如，2. 5-3.0g/dL)或截点值（例如，2.8g/dL)，并且（2)所述个体血液中一种或 多种免疫分析物的浓度小于健康个体血液中相对应的免疫分析物的中值浓度（然而，对 于IL-6,适用条件是个体血液中的浓度大于健康个体血液中IL-6的中值浓度），则所述个 体被鉴定为具有威胁生命的肝损伤。备选地，如果个体的血清白蛋白浓度在预选范围（例 如，2.5-3.(^/也）之内（或之上）或者大于预选的截点（例如，2.8 §/也)，和/或个体血液 中的所述免疫分析物浓度不全小于健康个体中相对应的免疫分析物的中值浓度（然而，对 于IL-6,适用条件是个体血液中的浓度不大于健康个体血液中IL-6的中值浓度），则所述 个体被鉴定为具有不威胁生命的肝损伤。按照本发明的其他实施方案，如果（i)从受试者 血液样品得到的血清白蛋白浓度值在预选范围（例如，3. 0-4. Og/dL或3. 5-5. Og/dL)之内 (或之上）或大于预选截点（例如，2. 8g/dL，3. 2g/dL或3. 5g/dL)，并且（ii)从所述受试者 血液样品得到的一种或多种免疫分析物的浓度全部都大于或等于健康受试者中相对应的 免疫分析物的中值浓度，则所述个体（例如，临床试验中的受试者）被鉴定为具有正常的肝 功能。
[0045] 对于本发明涉及评估作为临床试验的一部分的受试者中的肝损伤的方法，如果受 试者被鉴定为具有威胁生命的肝损伤，则可以将该受试者从临床试验中去除。类似地，如果 受试者被鉴定为具有不危险生命的肝损伤，则可以将该受试者从临床试验中去除。
[0046] 对于参与临床试验的受试者，存在在临床试验过程中的多个时间点（例如，在临 床试验之前，在试验开始时，和在试验过程中的一个或多个时间点）评估肝损伤的可能性。 因此，在某些实施方案中，在试验过程中评估肝损伤至少进行两次。因此，可以在试验过程 中追踪肝损伤的程度（如果存在的话）。在某些实施方案中，由于在试验过程中受试者具有 正常肝功能的鉴定变为具有不威胁生命的肝损伤，而将该受试者从临床试验中去除。在某 些实施方案中，由于在试验过程中受试者具有正常肝功能的鉴定变为具有威胁生命的肝损 伤，而将该受试者从临床试验中去除。在其他实施方案中，如果在试验过程中受试者具有不 威胁生命的肝损伤的鉴定变为具有威胁生命的肝损伤，则将该受试者从临床试验中去除。
[0047] 按照本发明的某些实施方案，可以基于测量的免疫分析物浓度和血清白蛋白浓度 的分析与比较，完成鉴定患者具有从肝损伤存活的高可能性（例如，90%以上的机会再活 六个月）或从肝损伤死亡的高可能性（例如，除非进行肝移植，90%以上的机会在接下来的 六个月内死亡）。例如，当样品的测量的血清白蛋白浓度值大于2. 8g/dL时，或当样品的一 种或多种测量的免疫分析物浓度中的任一种小于健康个体血液中存在的相对应的免疫分 析物的中值浓度时，患者可以被鉴定为具有从肝损伤存活的高可能性。此外，当从样品获得 的血清白蛋白浓度值小于或等于2. 8g/dL时，并且当样品的一种或多种免疫分析物的浓度 全部都小于健康个体血液中存在的相对应的免疫分析物的中值浓度时，患者可以被鉴定为 具有由肝损伤死亡的高可能性。
[0048] 在本发明的某些实施方案中，目的免疫分析物包含IL-17 ;RANTES ;H)GF-bb ;和 FGF b。例如，可以得到关于IL-17;RANTES;roGF-bb;和FGF b中的每一种的浓度值（例 如，测量的或测定的），并且与代表健康个体（例如，健康肝脏）的关于IL-17 ;RANTES ; H)GF-bb ;和FGF b中的每一种的给定的中值浓度值进行比较。即，血液样品的测量的IL-17 浓度值与代表健康个体的给定的IL-17的中值浓度值进行比较；血液样品的测量的RANTES 浓度值与代表健康个体的给定的RANTES的中值浓度值进行比较；等等。在某些实施方案 中，从患者血液样品获得浓度值的仅有的免疫分析物是IL-17 ;RANTES ;PDGF-bb ;和FGF b。
[0049] 在本发明的某些实施方案中，目的免疫分析物包括IL-17 ;TNFa ;RANTES和FGF b。 例如，可以得到关于IL-17 ;TNFa ;RANTES和FGF b中的每一种的浓度值（例如，测量的或测 定的），并且与代表健康个体（例如，健康肝脏）的关于IL-17 ;TNFa ;RANTES和FGF b中的 每一种的给定的中值浓度值进行比较。即，血液样品的测量的IL-17浓度值与代表健康个 体的给定的IL-17的中值浓度值进行比较；血液样品的测量的PGFb浓度值与代表健康个体 的给定的PGFb的中值浓度值进行比较；等等。在某些实施方案中，从患者血液样品获得浓 度值的仅有的免疫分析物是IL-17 ;TNFa ;RANTES和FGF b。
[0050] 在本发明的某些实施方案中，目的免疫分析物包括IL-17 ;roGFbb ;RANTES ;和 IL-4。例如，可以得到关于IL-17 fDGFbb ;RANTES ;和IL-4中的每一种的浓度值（例如，测 量的或测定的），并且与代表健康个体（例如，健康肝脏）的关于IL-17 ;H)GFbb ;RANTES ;和 IL-4中的每一种的给定的中值浓度值进行比较。即，血液样品的测量的IL-17浓度值与代 表健康个体的给定的IL-17的中值浓度值进行比较；血液样品的测量的IL-4浓度值与代表 健康个体的给定的IL-4的中值浓度值进行比较；等等。在某些实施方案中，从患者血液样 品获得浓度值的仅有的免疫分析物是IL-17 ;H)GFbb ;RANTES ;和IL-4。
[0051] 在本发明的某些实施方案中，目的免疫分析物包括IL-17 ;H)GFbb ;RANTES ;和 IL-13。例如，可以得到关于IL-17 fDGFbb ;RANTES ;和IL-13中的每一种的浓度值（例如， 测量的或测定的），并且与代表健康个体（例如，健康肝脏）的关于IL-17 ;H)GFbb ;RANTES ; 和IL-13中的每一种的给定的中值浓度值进行比较。即，血液样品的测量的IL-17浓度值 与代表健康个体的给定的IL-17的中值浓度值进行比较；血液样品的测量的IL-13浓度值 与代表健康个体的给定的IL-13的中值浓度值进行比较；等等。在某些实施方案中，从患者 血液样品获得浓度值的仅有的免疫分析物是IL-17 ;H)GFbb ;RANTES ;和IL-13。
[0052] 在本发明的某些优选的实施方案中，目的免疫分析物包括IL-17 ;H)GFbb ; RANTES ;和IL-9。例如，可以得到关于IL-17 fDGFbb ;RANTES ;和IL-9中的每一种的浓度值 (例如，测量的或测定的），并且与代表健康个体（例如，健康肝脏）的关于IL-17 ;H)GFbb ; RANTES ;和IL-9中的每一种的给定的中值浓度值进行比较。即，血液样品的测量的IL-17 浓度值与代表健康个体的给定的IL-17的中值浓度值进行比较；血液样品的测量的IL-9浓 度值与代表健康个体的给定的IL-9的中值浓度值进行比较；等等。在某些实施方案中，从 患者血液样品获得浓度值的仅有的免疫分析物是IL-17 ;H)GF bb ;RANTES ;和IL-9。
[0053] 在一个备选的实施方案中，目的免疫分析物包括IL-17 ;RANTES ;IL-9 ;和IL-6。例 如，可以得到关于IL-17 ;RANTES ;IL-9 ;和IL-6中的每一种的浓度值（例如，测量的或测定 的），并且与代表健康个体（例如，健康肝脏）的关于IL-17 ;RANTES ;IL-9 ;和IL-6中的每 一种的给定的中值浓度值进行比较。即，血液样品的测量的IL-17浓度值与代表健康个体 的给定的IL-17的中值浓度值进行比较；血液样品的测量的IL-6浓度值与代表健康个体 的给定的IL-6的中值浓度值进行比较；等等。在某些实施方案中，从患者血液样品获得浓 度值的仅有的免疫分析物是IL-17 ;RANTES ;IL-9 ;和IL-6。在这些目的免疫分析物包括或 由IL-17 ;RANTES ;IL-9 ;和IL-6组成的特定的实施方案中，当（i)患者血液样品中IL-17 ; RANTES ;IL-9的测量的浓度值小于代表健康个体的中值时，（ii)患者血液样品中IL-6的测 量的浓度值高于代表健康个体的中值时；并且患者血液样品中测量的血清白蛋白值小于预 先确定的范围（例如，2-5g/dL，2-4g/dL，2-3g/dL，或2. 5-3. Og/dL)或小于或等于预先确定 的截点值（例如，3. 5g/dL，3. 2g/dL，或2. 8g/dL)，预测或鉴定高死亡可能性的鉴定。
[0054] 按照某些实施方案，所述方法可以包括通知个体/受试者诊断（即，鉴定）和/或 开出适合的治疗的另外的步骤。对于鉴定具有不威胁生命的肝损伤的个体/受试者，适合 的治疗可以包括支持性医护，例如，改善营养和维持水合与电解质。对于鉴定具有威胁生 命的肝损伤的个体/受试者，适合的治疗可以包括开药（例如，皮质类固醇，如泼尼松），和 /或推荐肝移植程序。本发明某些实施方案所述的方法可以进一步包括在鉴定特定的患者 如果不进行肝移植将具有死于肝损伤的高可能性（例如，在肝损伤发作后的六个月内大于 90%的死亡机会）之后对所述患者进行肝移植的步骤。
[0055] 本发明的某些实施方案所述的方法能够准确地预测或鉴定哪些患者（例如，人或 其他哺乳动物）具有在肝损伤（例如，DILI)发作后6个月内死亡的高可能性。例如，本发 明的实施方案所述的方法可以鉴定或预测患者死于肝损伤的高可能性，其中死亡的可能性 是约80%-100% (例如，85% _99%，90%-99%或95%-99%)。即，确定或鉴定患者死于 肝损伤的"高可能性"可以包括约80% -100% (例如，85% _99%，90% -99%，或95-99% ) 的准确性。
[0056] 类似地，本发明某些实施方案所述的方法可以准确地预测或鉴定哪些患者（例 如，人或其他哺乳动物）具有自肝损伤发作后存活超过6个月的高可能性。例如，本发明 的实施方案所述的方法可以鉴定或预测患者存活的高可能性，其中存活的可能性是有约 80%-100% (例如，85%-99%，90%-99%，或95%-99%)的机会自肝损伤发作后存活超 过6个月。即，确定或鉴定患者从肝损伤存活的"高可能性"可以具有约80%-100% (例 如，85% -99%，90% -99%，或 95-99% )的准确性。
[0057] 图1示例本发明某些实施方案所述的方法。如图1所示，开始步骤可以包括从患 者获得血液样品1的步骤。血液样品可以进行一种或多种分析技术以测量目的免疫分析 物10各自的浓度和测量血清白蛋白浓度15。在步骤12中，将测量的目的免疫分析物（例 如，IL-17 ;H)GF bb ;RANTES ;和IL-9)的各自的浓度与关于这些具体的分析物的中值进行 比较。关于代表健康个体的免疫分析物的中值可以包括表1(见下）中所提供的值。
[0058]
[0059] 表1 :用于与血液样品的测量的免疫分析物的值比较的免疫分析物的中值
[0060] 步骤17中，可以分析所测量的血清白蛋白浓度（来自步骤15)，以确定所测量的 浓度是否小于或等于预先确定的截点2. 8g/dL (按照这些具体的实施方案）。步骤30包括 确定样品中所测量的血清白蛋白浓度是否小于或等于预先确定的截点2. 8g/dL(按照这些 具体的实施方案），并且确定所测量的目的免疫分析物的浓度中的每一种是否小于代表健 康个体（例如，具有健康的肝脏）的相对应的中值。如果确定所测量的血液样品的浓度水 平满足这两个要求，那么可以进行步骤40,该步骤包括提供肝移植的推荐，优选在该确定的 6个月内或在肝损伤发作（如果可查明或是已知的）的6个月内。在所测量的浓度水平不 满足任一（或两个）要求的情形中，那么可以进行步骤50,该步骤包括推断出该患者没有在 接下来的六个月内或自肝病发作起（如果可查明或是已知的）的6个月内死亡的危险。步 骤50可以进一步包括不优先排序该患者接受肝移植的步骤。
[0061] 图2示例本发明所述的某些优选的实施方案。在此类实施方案中，进行包括从患 者获得血液样品的开始步骤100。血液样品进行步骤200,包括测量下述四种特定的免疫分 析物 ：几-17;^^?此；狀阶^5;和11-9。另外，获得样品中血清白蛋白的浓度。随后，进行 步骤300,该步骤包括比较测量的免疫分析物浓度和关于每种免疫分析物的参照中值浓度 水平。在图2所示的这些具体的实施方案中，取决于对于给定的免疫分析物的测量的浓度 是否小于所述参照中值浓度，将每种测量的免疫分析物分配"低于中值"（"BM"）值或"1" 或"0"。步骤400,500,600和700包括为每个测量的目的免疫分析物分配BM( 即，步骤400 为IL-17 ;步骤500为IL-9 ;步骤600为PDFGF bb ;步骤700为RANTES)。一旦已经为每种 目的免疫分析物分配BM，进行步骤800,其中通过将所有BM值相加在一起计算"低于中值的 数"。对于图2所示的实施方案，由于仅测量了四种免疫分析物，所以最大的NBM是四（4)。 随后，进行步骤900,其包括基于所计算的NBM和测量的血清白蛋白浓度确定或预测患者将 存活还是不存活。例如，如果测量的血清白蛋白浓度大于2. 8g/dL或NBM小于4 (对于这些 具体的实施方案），那么该患者将自肝损伤发作起存活至少6个月。然而，如果测量的血清 白蛋白浓度不大于2. 8g/dL，并且NBM等于4,那么预计该患者将不能从肝损伤存活，并且如 果没有进行肝移植，可能在其发作起6个月内死亡。
[0062] 在另一方面中，本发明提供针对接受肝移植对多名患者进行优先排序的方法，包 括第一名患者和第二名患者。在这一点上，更急需肝移植的患者可以比可能完全不需要肝 移植或对肝移植的需要至少不那么急迫的患者优先排序。按照本发明的某些实施方案，从 患有（或相信患有）肝损伤的多个个体获取各自的血液样品。对于每份样品，得到（例如， 通过适当的测定测量）血清白蛋白的浓度值，并且得到（例如，测定的）一种或多种免疫分 析物的各自的浓度值，所述免疫分析物选自由以下组成的组：TNFa，IL-12, IL-17, IL-4， IL-5, IL-13, IL-9, MIP-1 0，RANTES，FGF b，PDGF-bb，和 IL-6。得到的第一名个体的免疫 分析物浓度值可以与健康个体相对应的中值免疫分析物浓度进行比较，以确定由所述样品 测量的一种或多种免疫分析物的浓度中的任一种是否小于健康个体中相对应的中值免疫 分析物浓度。类似地，得到的第二名个体的免疫分析物浓度值可以与健康个体相对应的中 值免疫分析物浓度进行比较，以确定由所述样品测量的一种或多种免疫分析物的浓度中的 任一种是否小于健康个体中相对应的中值免疫分析物浓度。接下来，进行确定下述中的一 种的步骤：（i)第一名个体的样品具有大于预先确定的截点值（例如，2. 8g/dL)的血清白蛋 白浓度值，或（ii)第一名个体的样品的一种或多种免疫分析物的浓度中的任一种小于健 康个体中相对应的中值免疫分析物浓度。关于第二名个体，进行确定下述中的一种的步骤： (i)第二名个体的样品具有小于或等于预先确定的截点值（例如，2. 8g/dL)的血清白蛋白 浓度值，和（ii)第二名个体的样品的一种或多种免疫分析物的浓度全部都小于健康个体 中相对应的中值免疫分析物浓度。按照本发明