，P.，X. Meng，S. N. Lavergne，S. El-Ghaiesh，M. Monshi， C. Earnshaw，D. Peckham，J. Gooi，S. Conway，M. Pirmohamed，R. E. Jenkins，D. J. Naisbitt， 和 B. K.Park. 2011. Mass spectrometric characterization of circulating and functional antigens derived from piperacillin in patients with cystic fibrosis (在患有囊性纤维化的患者中来源于呢拉西林的循环和功能性抗原的质谱表 征）.J Immunol(免疫学杂志）187:200-211.
[0183] 42. Bonkovsky，H.L，和 J. Brisbane. 1976. Colitis and hepatitis caused by methyldopa (由甲基多巴引起的结肠炎和肝炎）.JAMA236:1602-1603.
[0184]43. Tujios，S.，和 R. J. Fontana. 2011. Mechanisms of drug-induced liver injury:from bedside to bench(药物诱导的肝损伤的机制：从实验台到临床）.Nat Rev Gastroenterol Hepatol (自然胃肠病学肝脏病学综述）8:202-211.
[0185] Steuerwald等SerumimmuneanalytesinDILI(DILI中的血清免疫分析 物）09-14-2012
[0186] 44.Uetrecht? J. 2009. Immunoallergic drug-induced liver injury in humans (人类中免疫过敏性药物诱导的肝损伤）.Semin Liver Dis29:383-392.
[0187]45. Nakashima，H.，M. Akahoshi，和 K. Masutani. 2006. Thl/Th2balance of SLE patients with lupus nephritis (患有狼疮肾炎的 SLE 患者的 Thl/Th2 平衡）.Rinsho Byori 54:706-713.
[0188]46. Cacoub，P.，P. Musette，V. Descamps，0? Meyer，C. Speirs，L. Finzi，和 J. C. Roujeau. 2011. The DRESS syndrome:a literature review(DRESS 综合征：文献综 述）.Am J Med(美国医学杂志）124:588-597.
[0189]47. Chalasani，N.，R. Vuppalanchi，V. J. Navarro, R. J. Fontana，H. L Bonkovsky， H. Barnhart，D.Kleiner， 和 J.H.Hoofnagle.2012.Acute liver injury due to flavocoxid(Limbrel?)，a medical food for osteoarthritis:a case series (由 flav〇c〇xid(Limbrel?)(-种用于骨关节炎的药物食品）导致的急性肝损伤：病例系 列）.Ann Intern Med In press (待出版的年度国际医学）.
[0190]48. Orman，E. S.，H. S. Conjeevaram，R. Vuppalanchi，J. W. Freston，J. Rochon， D.E.Kleiner? 和P.H.Hayashi. 2011.Clinicalandhistopathologicfeaturesof fluoroquinolone-inducedliverinjury(氟喹诺酮诱导的肝损伤的临床和组织病理学特 征）.ClinGastroenterolHepatol(临床胃肠病学肝脏病学）9:517_523e513.
[0191] 49.Vuppalanchi，R.，P.H.Hayashi，N.Chalasani，R.J.Fontana，H.Bonkovsky， R.Saxena，D.Kleiner， 和J.H.Hoofnagle. 2010.Duloxetinehepatotoxicity:a case-seriesfromthedrug-inducedliverinjurynetwork(度洛西汀月干毒性：来 自药物诱导的肝损伤网络的病例系列）.AlimentPharmacolTher(营养物药理学治 疗）32:1174-1183.
[0192] 50.Hammerich，L，F.Heymann，和F.Tacke. 2011.RoleofIL_17andThl7cellsin liverdiseases(IL-17和Thl7细胞在肝病中的作用）.ClinDevImmunol(临床发育免疫 学）2011:345803.
[0193] 51 ?Aranami，T?，和T.Yamamura. 2008.Th17Ce11sandautoimmune encephalomyelitis(EAE/MS) (Thl7 细胞和自身免疫性脑脊髓炎）?AllergolInt 57:115-120.
[0194] 52.Seiderer，J.，I.Elben，J.Diegelmann，J.Glas，J.Stallhofer，C.Tillack， S. Pfennig，M.Jurgens，S.Schmechel，A.Konrad，B.Goke，T.Ochsenkuhn，B.Muller-Myhsok， P.Lohse，和S.Brand. 2008.RoleofthenovelThl7cytokineIL-17Fininflammatory boweldisease(IBD):upregulatedcolonicIL-17FexpressioninactiveCrohn's diseaseandanalysisoftheIL17Fp.Hisl61ArgpolymorphisminIBD(新型Thl7细胞 因子IL-17F在炎性肠病（IBD)中的作用：在急性局限性肠炎中上调的结肠IL-17F表达和 IBD中IL17Fp.Hisl61Arg多态性的分析）.InflammBowelDis(炎性肠病）14:437-445.
[0195] 53.Hickman-Brecks，C.L.，J.L.Racz，D.M.Meyer，T.P.LaBranche，和 P.M.Allen. 2010.Thl7cellscanprovideBcellhelpinautoantibodyinduced arthritis(在自身抗体诱导的关节炎中Thl7细胞可以提供B细胞辅助作用）.J Autoimmun(自身免疫学杂志）36:65_75.
【主权项】
I. 一种表征个体中的肝损伤的方法，所述方法包括： a. 直接或间接获得在来自所述个体的血液样品中的血清白蛋白的浓度值； b. 直接或间接获得在来自所述个体的所述血液样品中选自由以下组成的组的一种 或多种免疫分析物的浓度值：TNFa;IL-12 ;IL-17 ;IL-4 ;IL-5 ;IL-13 ;IL-9 ;MIP-10 ; RANTES;FGFb;和PDGF-bb; c. 确定步骤（a)的血清白蛋白浓度值是（i)小于或等于2. 8g/dL，还是（ii)大于2. 8g/ dL； d. 将步骤（b)的所述一种或多种免疫分析物的浓度与来自健康个体的相对应的中值 免疫分析物浓度进行比较，以确定步骤（b)的所述一种或多种免疫分析物的浓度中的任一 种是否小于来自健康个体的相对应的中值免疫分析物浓度；和 e. 鉴定所述个体：
1. 如果步骤（a)的血清白蛋白浓度值小于或等于2. 8g/dL，并且步骤（b)所述的一种 或多种免疫分析物的浓度中的每一种都小于来自健康个体的相对应的中值免疫分析物浓 度，则鉴定所述个体具有威胁生命的肝损伤；或 ii.如果步骤（a)的血清白蛋白浓度值大于2. 8g/dL，和/或步骤（b)的免疫分析物浓 度不都是小于来自健康个体的相对应的中值免疫分析物浓度，则鉴定所述个体具有不威胁 生命的肝损伤。
2. 权利要求1的方法，其还包括开出适合所述个体的鉴定状态的医学护理处方。
3. 权利要求2的方法，其中开处方包括：如果所述个体被鉴定具有威胁生命的肝损伤， 则为所述个体推荐肝移植程序。
4. 权利要求1-3中任一项的方法，其还包括：如果所述个体被鉴定具有威胁生命的肝 损伤，则对所述个体进行肝移植的步骤。
5. 权利要求1-4中任一项的方法，其中所述血液样品是血清样品。
6. 权利要求1-5中任一项的方法，其中所述个体是人。
7. 权利要求1-6中任一项的方法，其中步骤（b)包括直接或间接获得关于选自由以下 组成的组的至少三种免疫分析物的浓度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9， MIP-I0，RANTES，FGFb，PDGF-bb和IL-6。
8. 权利要求7的方法，其中步骤（b)包括直接或间接获得关于选自由以下组成的组的 四种免疫分析物的浓度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9，MIP-1 0，RANTES， FGFb，PDGF-bb和IL-6。
9. 权利要求1-8中任一项的方法，其中步骤（b)包括获得关于IL-17的浓度值。
10. 权利要求1-9中任一项的方法，其中步骤（b)包括获得关于RANTES的浓度值。 II. 权利要求1-10中任一项的方法，其中步骤（b)包括获得关于I3DGFbb的浓度值。
12. 权利要求9-11中任一项的方法，其中步骤（b)包括获得关于选自由以下组成的组 的免疫分析物的浓度值：IL_4,IL-13,IL-9和FGFb。
13. 权利要求9或10的方法，其中步骤（b)包括获得关于TNFa和FGFb的浓度值。
14. 权利要求1-13中任一项的方法，其中步骤（b)还包括获得来自所述个体的血液样 品中的IL-6的浓度值，其中大于来自健康个体的相对应的中值免疫分析物浓度的IL-6浓 度值与鉴定所述个体具有急性或亚急性肝损伤一致。
15. -种评估招募到临床试验中的受试者中的肝损伤的方法，所述方法包括： a. 直接或间接获得来自所述受试者的血液样品中的血清白蛋白的浓度值； b. 直接或间接获得来自所述受试者的血液样品中选自由以下组成的组的一种或多种 免疫分析物的浓度值：TNFa;IL-12 ;IL-17 ;IL-4 ;IL-5 ;IL-13 ;IL-9 ;MIP-10;RANTES; FGFb;和PDGF-bb; c. 确定步骤（a)的血清白蛋白浓度值是（i)小于或等于2. 8g/dL，还是（ii)大于2. 8g/ dL； d. 将步骤（b)的所述一种或多种免疫分析物的浓度与来自健康受试者的相对应的中 值免疫分析物浓度进行比较，以确定步骤（b)的所述一种或多种免疫分析物的浓度中的任 一种是否小于来自健康受试者的相对应的中值免疫分析物浓度；和 e. 鉴定所述受试者： i. 如果步骤（a)的血清白蛋白浓度值小于或等于2. 8g/dL，并且步骤（b)所述的一种 或多种免疫分析物的浓度中的每一种都小于来自健康受试者的相对应的中值免疫分析物 浓度，则鉴定所述受试者具有威胁生命的肝损伤； ii. 如果步骤（a)的血清白蛋白浓度值大于2. 8g/dL，步骤（b)的免疫分析物浓度不都 是小于来自健康受试者的相对应的中值免疫分析物浓度，或者二者，则鉴定所述受试者具 有不威胁生命的肝损伤；或 iii. 如果步骤（a)的血清白蛋白浓度值大于2. 8g/dL，并且步骤（b)所述的一种或多 种免疫分析物的浓度全部大于或等于来自健康受试者的相对应的中值免疫分析物浓度，则 鉴定所述受试者具有正常的肝功能。
16. 权利要求15的方法，其中所述血液样品是血清样品。
17. 权利要求15或16的方法，其中步骤（b)包括直接或间接获得选自由以下组成 的组中的至少三种免疫分析物的浓度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9， MIP-I0，RANTES，FGFb，PDGF-bb和IL-6。
18. 权利要求15-17中任一项的方法，其中步骤（b)包括直接或间接获得选自由以 下组成的组的四种免疫分析物的浓度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9， MIP-I0，RANTES，FGFb，PDGF-bb和IL-6。
19. 权利要求15-18中任一项的方法，其中步骤（b)包括直接或间接获得IL-17、 RANTES、PDGF-bb和IL-9 的浓度值。
20. 权利要求15-19中任一项的方法，其中如果所述受试者被鉴定具有威胁生命的肝 损伤，则将所述受试者从所述临床试验中去除。
21. 权利要求15-19中任一项的方法，其中如果所述受试者被鉴定具有不威胁生命的 肝损伤，则将所述受试者从所述临床试验中去除。
22. 权利要求15的方法，其中步骤（a) - (e)在所述临床试验开始时进行，然后在所述临 床试验过程中重复至少一次。
23. 权利要求22的方法，其还包括：如果在所述临床试验过程中所述受试者的鉴定从 具有正常的肝功能改变为具有不威胁生命或威胁生命的肝损伤，则将所述受试者从所述试 验中去除。
24. 权利要求22的方法，其还包括：如果在所述临床试验过程中所述受试者的鉴定从 具有不威胁生命的肝损伤改变为具有威胁生命的肝损伤，则将所述受试者从所述试验中去 除。
25. -种试剂盒，其包括：第一抗体，所述第一抗体适于检测并定量选自由以下组成的 组的免疫分析物：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9,MIP-I0，RANTES，FGFb， H)GF-bb，IL-6和血清白蛋白；和关于按照权利要求1的方法表征个体的肝损伤的使用说 明。
26. 权利要求25的试剂盒，其还包括第二、第三和第四抗体，每种抗体适于检测选自 由以下组成的组的免疫分析物：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5,IL-13,IL-9,MIP-I0， RANTES，FGFb，PDGF-bb，IL-6 和血清白蛋白。
27. 权利要求25的试剂盒，其中所述第一抗体与选自由以下组成的组的免疫分析物结 合：IL-9,IL-17,RANTES和PDGF-bb。
28. 权利要求25的试剂盒，其中所述第一、第二、第三和第四抗体检测并定量IL-9、 IL-17、RANTES和PDGF-bb中的每一种。
29. 权利要求25的试剂盒，其中所述第一抗体连接在固体支持物上。
30. 权利要求26的试剂盒，其中所述第一、第二、第三和第四抗体连接在固体支持物 上。
31. 权利要求29或30的试剂盒，其中所述固体支持物提供多路测定，所述多路测定适 于同时检测和定量选自由以下组成的组中的至少四种免疫分析物：TNFa，IL-12,IL-17， IL-4,IL-5,IL-13,IL-9,MIP-I0，RANTES，FGFb，PDGF-bb和IL-6。
32. 权利要求31的试剂盒，其中所述多路测定检测并定量IL-9、IL-17、RANTES和 F1DGFHob中的每一种。
33. 权利要求25的试剂盒，其中所述使用说明还包括列出具有健康肝脏的个体中每种 免疫分析物的中值浓度的表格。
34. -种针对接受肝移植对多名患者进行优先排序的方法，所述方法包括： a. 直接或间接获得来自包括第一个体和第二个体的多个个体的各自的血液样品中血 清白蛋白的浓度值； b. 直接或间接获得来自包括第一个体和第二个体的多个个体的各自的血液样品中选 自由以下组成的组的一种或多种免疫分析物的浓度值：TNFa，IL-12,IL-17,IL-4,IL-5， IL-13,IL-9,MIP-I0，RANTES，FGFb，PDGF-bb和IL-6 ; c. 将与所述第一个体相关的步骤（b)所述的一种或多种免疫分析物的浓度与来自健 康个体的相对应的中值免疫分析物浓度相比较，以确定步骤（b)所述的一种或多种免疫分 析物的浓度中的任一种是否小于来自健康个体的相对应的中值免疫分析物浓度； d. 将与所述第二个体相关的步骤（b)所述的一种或多种免疫分析物的浓度与来自健 康个体的相对应的中值免疫分析物浓度相比较，以确定步骤（b)所述的一种或多种免疫分 析物的浓度中的任一种是否小于来自健康个体的相对应的中值免疫分析物浓度； e. 确定（i)所述第一个体具有大于2. 8g/dL的步骤（a)的血清白蛋白浓度值，或（ii) 步骤（b)所述的一种或多种免疫分析物的浓度中的任一种小于来自健康个体的相对应的 中值免疫分析物浓度； f. 确定（i)所述第二个体具有小于或等于2. 8g/dL的步骤（a)的血清白蛋白浓度值， 或（ii)步骤（b)所述的一种或多种免疫分析物的浓度全部小于来自健康个体的相对应的 中值免疫分析物浓度；和 g.鉴定所述第二个体比所述第一个体具有更高的死于肝损伤的危险。
35. 权利要求34的方法，其还包括：提供在对所述第一个体进行肝移植之前对所述第 二个体进行肝移植的推荐。
36. 权利要求34的方法，其中在提供所述推荐的6个月内对所述第二个体进行肝移植。
【专利摘要】本发明提供用于表征个体中的肝损伤的方法和试剂盒。所述方法利用免疫分析物作为生物标记来检测肝损伤，并且预测患有肝损伤的个体将经历威胁生命的肝衰竭的可能性。从由个体采集的血液样品获得或确定血清白蛋白和其他鉴定的免疫分析物的浓度值。然后，将得到的浓度值与来自具有健康的肝脏的个体的相对应的浓度进行比较。通过比较浓度，可以鉴定个体发展威胁生命的肝衰竭和在给定的时间期间(例如，6个月)内需要肝移植的可能性。
【IPC分类】G01N33/50
【公开号】CN104937414
【申请号】CN201380066876
【发明人】赫伯特·L·邦科夫斯基, 大卫·富罗, H·詹姆斯·诺顿, 努雷·施托伊雷尔沃德
【申请人】夏洛特-梅克伦堡医院(商业用名:卡罗来纳保健系统)
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2013年10月24日
【公告号】EP2923202A1, US20150301066, WO2014066676A1