floxacin:+ESIEIC(400. 14672. 417. 17327. 422. 12867)Scan Frag= 130. 0VA-10ug.d〇
[0043] 图2是为筛查出样品中含有诺氟沙星的流程图；
[0044] 2-1是筛出诺氟沙星的提取色谱图；2-2是所筛出的诺氟沙星质谱图；2-3是筛查 匹配结果。
[0045] 图3是鱼肉中检出的诺氟沙星的示意图；
[0046] 3-1为诺氟沙星标准品二级碎片离子质谱图，3-2为鱼肉样品中所含诺氟沙星的 二级碎片离子质谱图。
[0047] 图4是可疑环丙沙星样品总离子流色谱图与质谱确证图；
[0048] 4-1为环丙沙星样品总离子流色谱图（上图）与标准品色谱图（下图）；4_2为可 疑物的质谱图；4-3为环丙沙星标准品质谱图。
【具体实施方式】
[0049] 以下结合实施例和对比例对本发明进行阐述，然而本发明的保护范围并非仅仅局 限于以下实施例。所属技术领域的普通技术人员依据本发明公开的内容，均可实现本发明 的结果。1试剂和材料
[0050] 1.1乙腈、甲醇色谱纯
[0051] 1 · 2醋酸铵，甲酸，色谱纯
[0052] 1. 3标准品：磺胺胍、磺胺吡啶、磺胺嘧啶、磺胺甲噁挫、磺胺噻挫、恶喹酸、磺胺甲 嘧啶、磺胺二甲异唑、磺胺甲二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺二甲基异嘧啶、磺胺对甲氧基嘧 啶、磺胺间甲氧基嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺喹恶啉、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺二甲基哒嗪、诺 氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、培氟沙星、洛美沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、氟罗沙 星、沙拉沙星、司帕沙星、奥比沙星、双氟沙星、青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、苯唑西林、萘 夫西林、头孢氨苄、头孢匹林、头孢唑林、头孢洛宁、头孢匹罗、头孢喹肟、红霉素、甲基睾丸 酮、诺龙、丙酸睾酮和群勃龙（纯度均大于95%)。WatersOasisHLB小柱，200mg/6mL。
[0053] 2仪器设备
[0054]2. 1Agilent1290-6540液相色谱-四级杆飞行时间质谱仪，配有DualAgilent JetStreamElectrosprayIonization(DualAJSESI)源。
[0055] 2. 2 天平：精确至 0·OOlg和 0·OOOlg。
[0056] 2· 3 离心机：4000r/min。
[0057] 2· 4 50mL，500mL，lOOOmL容量瓶。
[0058]实施例1、一种同时快速筛查水产品中46种药物残留的液相色谱-串联四级杆/ 飞行时间质谱方法；具体步骤如下：
[0059] 1 )、制备待测样品溶液：
[0060] (A)样品提取：准确称取待测水产品（水产品生物样）2. 00g，加入4mL水充分涡旋 混勾lmin后，加入6mL乙腈，祸旋混勾2min，静置2~3h后，3500r/min冷冻离心5min，取 5mL上清液，超纯水稀释至50mL，过玻璃纤维滤膜（孔径1. 5μm)。
[0061] (B)固相小柱萃取：利用固相萃取小柱对生物样品中所含的46种药物进行富集， 固相萃取小柱为OasisHLB小柱，先用6mL甲醇活化，6mL超纯水淋洗，再将50mL稀释液通过 活化好的HLB柱；富集过程中流速保持为5mL/min，整个过程保持小柱湿润；
[0062] (C)溶剂洗脱：用6mL甲醇/乙腈（V/V，1:1)洗脱，收集在10mL具塞刻度管；
[0063] (D)浓缩与定容：洗脱液35°C下氮吹至近干，100μL乙腈复溶，涡旋20s，再加入 900μL1 % (体积％ )甲酸水溶液，涡旋10s，经过0. 22μm有机滤膜过滤，待上机；
[0064]2)、46种药物一级、二级筛查谱库建立：
[0065] 通过查阅资料，利用AgilentMassHunterPCDLManager软件初步建立46种药物 的一级谱库信息。利用46种药物标准品配置浓度为10μg/mL的标准物质溶液（以甲醇 为溶剂），通过液相色谱-串联四级杆/飞行时间质谱法确认化合物的保留时间，完善一级 筛查谱库；再针对每种化合物，获取固定色质谱条件下的二级质谱信息，同样利用Agilent MassHunterPCDLManager软件建立化合物的二级筛查谱库。
[0066] 所得的一级筛查谱库、二级筛查谱库如表1所述。
[0067] 备注说明：浓度为10μg/mL的标准物质溶液上机前定容体积为lmL。
[0068] 具体液相色谱-串联四级杆/飞行时间质谱条件为：
[0069]高效液相色谱仪：HPLC_Agilentl290 ;
[0070]色谱柱：AgilentPlusC18柱，尺寸为3.OnmX100nm，1. 8μm;
[0071]柱温：40Γ;
[0072]流速：0· 25mL/min；
[0073] 梯度洗脱流动相：
[0074] A:加入甲酸的5mmol乙酸铵水溶液，所述甲酸的体积含量为0. 1%;
[0075]B:加入甲酸的甲醇；甲酸的体积含量为0. 1% ;
[0076] 流动相梯度：
[0077]
[0078]质谱仪：AgilentQ-T0F6540;
[0079] 离子源：DualAgilentJetStreamElectrosprayIonization(DualAJSESI) 源；
[0080] 电离模式：正离子模式；
[0081]MS扫描范围：100-1000m/z;
[0082] MS/MS碰撞电压固定3个强度通道（碰撞电压分别10eV，20eV，40eV)
[0083]进样量：2yL;
[0084] 46种药物的一级筛查谱库信息见表1。
[0085] 表1、46种药物的一级（二级）筛查谱库信息
[0086]
[0087] L0088」
[0089] 备注说明：上述一级筛查谱库包含以下信息：化合物的精确质量数，化合物的同 位素峰信息（由化合物分子式利用AgilentMassHunterPO)LManager软件可自行获取）， 以及化合物的保留时间，前两者由化合物本身决定，保留时间需要上文所述条件能获取。
[0090] 3)、样品筛查：根据流程2)中仪器色质谱条件，采用全扫描模式，调用已建立的质 谱一级筛查谱库以分子式匹配模式自动检索，质量允许误差设置5ppm;
[0091] g卩，具体为：将上述步骤1)所得的经过0. 22μm有机滤膜过滤的滤液1ml，按照上 述步骤2)所述条件进行检测；质谱仪器对化合物精确质量数进行扫描检测，实测值与理论 实际值（理论实际值由化合物分子式决定）存在误差，该方法中质量误差不能超过5ppm。
[0092] 4)、确证：对筛查发现的可疑化合物采用保留时间结合二级筛查谱库进一步确 证；
[0093] 具体为：通过一级筛查谱库对样品进行46种化合物筛查匹配，一级筛查谱库具体 要素包括化合物精确质量数，化合物质谱同位素峰丰度信息以及化合物的保留时间，每个 要素权重相同，并以此筛查匹配得分。对匹配得分超过70分的筛查结果确认其为疑似化合 物，采用targetms/ms模式对其进行二级质谱信息采集，与建立的二级质谱信息库（表1) 进行匹配确证，如有两个二级特征碎片离子能够匹配成功的，即为确证。
[0094] 二级筛查谱库即每个化合物的二级质谱碎片信息，包含了化合物在本发明条件下 获取的特征碎片离子。
[0095] 二级质谱信息就是该化合物母离子所对应的二级特征质谱碎片离子信息（即子 离子），至少要求两个子离子碎片信息；
[0096] -级筛查时，匹配得分<70分，即确定不含有此化合物，因此，无需上述确证。
[0097] 5)、定量：对于确证的药物，采用相应基质加标工作液曲线外标法定量。
[0098] 具体为：对于经过二级质谱信息匹配后确证的化合物，根据检测样品种类，选择同 种空白样品按本实施例步骤1制备基质提取液，用该液稀释