酸酢作为交联剂；采用大孔吸附树脂或活性炭或炭化树脂作为吸附剂载体， 控制吸附剂载体的粒径范围在0. 1毫米到1. 18毫米之间；聚乙締醇的种类为PVA-1792、 PVA-1788、PVA-2099、PVA-2088或PVA-1588;聚乙締醇水溶液的配制过程为：把聚乙締醇加 入到处于揽拌状态的水中，分散均匀后升溫至80°C，揽拌2小时后得到溶解充分、混合均匀 的聚乙締醇水溶液；DNA溶液的配制过程为：首先把纯度85%W上的小牛胸腺DNA溶解于 0. 2mol/L的抑=7. 4的Tris-肥L缓冲溶液中，得到浓度为2mg/ml至6mg/ml的DNA原溶 液；然后在DNA原液中依次加入等体积的氯化四氮挫兰饱和溶液和等体积的无水乙醇，揽 拌或振荡至完全溶解，得到DNA溶液；在过滤和水洗涂的步骤中，用2倍至5倍吸附剂载体 体积的无水乙醇分散吸附剂载体，抑被水洗涂至中性，在干燥过程中，首先风干至具有流动 性，然后在50°C至60°C下烘干2小时并冷却；聚乙締醇发生交联反应的理论交联度的计算 公式为：理论交联度=(η化A*Z/nPVA)X100%，其中，η化A表示交联剂的物质的量，Z表示交 联剂与PVA上0H基体的结合数，nPVA表示PVA单体的物质的量；催化剂为硫酸溶液，硫酸 溶液的浓度为0. 5mol/l，硫酸溶液的加入体积为交联剂物质的量的0. 1倍至0. 5倍。
【附图说明】
[00巧]图1是本发明DNA免疫吸附剂实施例的聚乙締醇的分子式。
[0026] 图2是本发明DNA免疫吸附剂实施例在使用戊二醒进行交联时的反应路线图。
[0027] 图3是本发明DNA免疫吸附剂实施例在使用马来酸酢进行交联时的反应路线图。
[0028]W下结合附图及实施例对本发明作进一步说明。
【具体实施方式】
[0029] 在本发明的实施例中，聚乙締醇在交联反应中使用的交联剂并无特别限制，可W 采用现有的任意种类的交联剂，只要能够保证实现本发明的发明目的即可。作为优选方案， 采用戊二醒、马来酸酢、乙二酸、丙二酸、下二酸、己二酸或运四种酸相应的酸酢作为交联 剂。
[0030] 在本发明的实施例中，吸附剂载体可W是现有技术中任意种类的用于负载DNA的 吸附剂载体。作为优选方案，可W采用大孔吸附树脂或活性炭或炭化树脂作为所述吸附剂 载体，且控制所述吸附剂载体的粒径范围在0. 1毫米到1. 18毫米之间。
[0031] 在本发明的实施例中，对于聚乙締醇的使用并无特别限制，只要能够实现本发明 的发明目的即可。另外，聚乙締醇的物理性质受到化学结构、醇解度和聚合度的综合影响。 其中，聚合度分为超高聚合度（分子量25万至30万）、高聚合度（分子量17万至22万）、 中聚合度（分子量12万至15万）和低聚合度(分子量2. 5万至3. 5万）。一般来说，聚合 度增大，则水溶液粘度增大，成膜后的强度和耐溶剂性提高。醇解度为78%至100%。
[0032] 本领域技术人员可W根据实际需求，选取合适种类的聚乙締醇。作为优选的方 案，PVA的分子量是3万至17万，具体地，聚乙締醇的种类可W为PVA-1792、PVA-1788、PVA-2099、PVA-2088或PVA-1588。另外，作为优选的方案，所用的PVA的形态的种类包括但 不限于PVA-1792 (Ξ维)、PVA-1788 (片)、PVA-2099 (片)、PVA-2088 (粒)、PVA-1588 (片)。
[0033] 在本发明的实施例中，PVA的交联反应使用的催化剂可W是现有的任意一种可催 化PVA交联反应的试剂。作为优选方案，催化剂为硫酸溶液，且优选的硫酸溶液的浓度为 0.5mol/L。
[0034] 在本发明的实施例中，为了方便下面的叙述，把聚乙締醇溶液的配制过程称为步 骤1，具体按照下面的步骤进行。根据确定好的浓度(按重量体积比算)，称取一定量的PVA 加入到揽拌的纯化水中，分散均匀后升溫到80°C揽拌2小时W上，使其充分溶解，得到均匀 分散的溶液。
[0035] 在本发明的实施例中，把DNA溶液的配制过程称为步骤2,具体按照下面的步骤进 行。把纯度85%W上的小牛胸腺DNA溶解于0. 2mol/L的抑=7. 4的化is-肥L缓冲溶液中， 配制浓度为2mg/ml至6mg/ml的DNA原溶液，然后往DNA原液中依次加入等体积的氯化四 氮挫兰饱和溶液和等体积的无水乙醇，揽拌或振荡至完全溶解，即为DNA溶液。
[0036] 聚乙締醇发生交联反应的理论交联度的计算公式为：理论交联度=(nCLA*Z/ nPVA)X100%，其中，η化A表示交联剂的物质的量，Z表示交联剂与PVA上OH基体的结合数， nPVA表示PVA单体的物质的量。具体地，当CLA为马来酸酢时，Z为2 ;当CLA为戌二醒时， Z为4。
[0037] 在本发明的实施例中，DNA免疫吸附剂的制备方法如下。基于交联度的不同，制备 方法具体包括两种优选的方案。其中，当聚乙締醇的理论交联度小于15%时，则按照第一 种方法的步骤进行，第一种方法的步骤如下：执行步骤A:首先，在聚乙締醇水溶液中加入 交联剂和催化剂发生交联反应得到交联聚乙締醇溶液；然后，向交联聚乙締醇溶液中加入 DNA溶液；接着，加入吸附剂载体，揽拌后DNA负载到吸附剂载体上，在吸附剂载体上形成交 联聚乙締醇膜，交联聚乙締醇膜对吸附剂载体形成包膜作用；然后执行步骤C，用滤袋过滤 后加入乙醇分散吸附剂载体并渐干。接着，用水洗涂至接近中性；最后，干燥得到成品。作 为优选的实施例，加入的DNA溶液与交联聚乙締醇溶液的体积比为0. 8 :1至1. 2 :1。
[003引其中，当聚乙締醇的理论交联度在15%W上诊15%)时，则按照第二种方法的步骤 进行，第二种方法的步骤如下：执行步骤B:首先，把聚乙締醇水溶液与DNA溶液混合；然 后，加入吸附剂载体，DNA负载到吸附剂载体上，在吸附剂载体上形成聚乙締醇膜；最后，加 入交联剂和催化剂发生交联反应得到交联聚乙締醇膜，交联聚乙締醇膜对吸附剂载体形成 包膜作用。接着，过滤后用水洗涂调节抑至中性；最后，干燥得到成品。作为优选的实施 例，聚乙締醇水溶液与DNA溶液的体积比为1 :0. 8至1 :1. 2。
[0039] 根据
【发明内容】
部分的论述，当PVA的理论交联度小于15%时，优选采用第一种方法 的步骤制备DNA免疫吸附剂。而当PVA的理论交联度大于或等于15%时，优选采用第二种 方法的步骤制备DNA免疫吸附剂。
[0040] 在本发明下面的实施例中，按照上面的第一种或者第二种方法得到DNA免疫吸附 剂之后，再把运种DNA免疫吸附剂与传统的火棉胶包膜的DNA免疫吸附剂作对比实验。
[0041] 具体地，首先将本发明实施例得到的DNA免疫吸附剂在使用前使用生理盐水浸泡 30分钟去除气泡，充分润湿后，取出一定量体积并吸干表面的水分。然后加入10倍DNA免 疫吸附剂体积的SLE病人血浆，在37°C气浴振荡中吸附2小时后。接着进行吸附前后SLE病人血浆中抗双链DM抗体浓度的检测。接着再W火棉胶包膜的DM免疫吸附剂作为对照 样进行实验。
[004引结果表明，含有交联PVA膜的DNA免疫吸附剂的吸附性能优于对照样。同时，由于PVA具有良好的生物相容性及亲水性，因此，本发明的实施例的DNA免疫吸附剂的血液相容 性较好，且对血液中其它有益成份的吸附及破坏率均较低。运就说明使用交联PVA对DNA 免疫吸附剂进行包膜具有很大的潜力及明显的应用前景，有望制备成第二代性能更优越的 DNA免疫吸附剂。
[0043] 实施例1:大孔吸附树的制备过程如下。
[0044] 在常溫下，将明胶溶解于水中，配成0. 5%至5%质量分数的反应水相，加热到30°C 至50°C，W苯乙締和二乙締苯的混合单体为反应油相，其中二乙締苯占混合单体总质量的 0. 5%至1. 5%，水相与油相体积比为3 :1，W过氧化苯甲酯为引发剂，引发剂用量为混合单体 总质量的1%-3%。经悬浮聚合，首先缓慢升溫至70°C至80°C后反应3小时W上，然后缓慢升 溫到85°C反应3小时，接着再缓慢升溫至95°CW上反应3小时，接着经过滤、洗涂处理后， 制备出低交联凝胶型聚苯乙締树脂，简称白球。
[0045] 常溫下在Ξ口瓶中加入白球，W氯甲酸和二氯乙烧的混合溶液充分溶胀，混合溶 液用量为白球质量的6倍至8倍，氯甲酸和二氯乙烧的体积比为1 :2,加入化化作为催化 剂，催化剂用量为低交联聚苯乙締质量的40%至80%，充分混匀后升溫到30°C至40°C，反应 8小时至12小时，经过滤、洗涂处理后，制备出低交联氯甲基化的苯乙締树脂，简称氯球。
[0046] 常溫下在Ξ口瓶中加入氯球，用二氯乙烧充分溶胀，二氯乙烧用量为氯球质量的 8倍至10倍，在揽拌下滴加四氯化锡和二氯乙烧混合溶液，混合溶液的用量为氯球质量的 50%至70%，且四氯化锡和二氯乙烧的体积比为1 :1至2 :1，W0. 5°C/min-2. 0°C/min的 速度将溫度升到80°C至100°C，反应8小时至10小时，将树脂取出惊干，真空干燥，得到聚 苯乙締-二乙締苯大孔吸附树脂下简称树脂)，运种树脂的粒径为0. 3mm至1. 0mm，比表 面积为1200m2/g至1600m2/g干树脂，平均孔径为2nm至3nm，孔隙率为50%至80%。
[0047]使用R40/3 标准筛，将合成的树脂按 0. 3mm、0. 5mm、0. 6mm、0. 71mm、0. 85mm、l. 0mm 或1. 18mm进行筛分，得到各种不同粒径范围的树脂。
[0048] 本实施例的PVA溶液的浓度为2% (w/v)，PVA的理论交联度为10%的DNA免疫吸 附剂的制备过程如下。
[0049] 首先，按照上述步骤1配制2% (w/v)的PVA-1788溶液1000ml。然后，按照理论交 联度10%，根据交联度公式计算加入所需马来酸酢的量约为22mmol并得到混合溶液，往上 述混合溶液中W5ml/min的速度滴加22ml稀释的浓硫酸溶液0. 5mol/l，滴加完后继续揽拌 1小时，得到均一溶液。
[0050] 接着，取该均一溶液100ml，加入按上述步骤2配制的等体积浓度为4mg/ml的DNA 溶液，揽拌5分钟混合均匀后即为包膜溶液。
[0051] 接着，往包膜溶液中加入160ml粒径为0. 85mm至1mm的上述的聚苯乙締-二乙締 苯大孔吸附树脂，揽拌5分钟后，用滤袋过滤，倒入无水乙醇中将吸附剂充分分散后渐干， 50°C烘干4小时，冷却后即为交联度为10%的DNA免疫吸附剂。
[0052] 实施例2 :相比于实施例1，本实施例将马来酸酢替换为浓度为50%的高纯度医用 级戊二醒水溶液（W下实施例中的戊二醒水溶液的浓度均为50%)，其它步骤与实施例1相 同，制备成交联度为10%的DNA免疫吸附剂。
[0053] 实施例3 :相比于实施例1，本实施例将实施例1中所用的聚苯乙締-二乙締苯大 孔吸附树脂改为上海汇合达产的活性炭，活性炭的粒径为0. 8mm至1mm，其它步骤与实施